02/18/2016
No.0275 タンパク質のCD分析
タンパク質、ペプチドなどのCD(円偏光二色性)測定を実施し、二次構造の評価、確認等を行っている。(信頼性基準対応可能)
以下に、タンパク質の二次構造解析及び温度可変測定の例を紹介する。
●タンパク質(抗体)の二次構造解析
【測定条件】
試料：human IgG 溶媒：PBS(-)
濃度：0.2 mg/mL 測定範囲：250～200 nm
温度：20℃ セル長 ：2 mm
【解析結果】
αへリックス：0 %
βシート：94 %
βターン，ランダム：6 %
●温度可変（熱力学的安定性）
【測定条件】
試料：TypeⅠ collagen 測定範囲：260～210 nm
溶媒：1 mmol/L HCl 温度：0℃→70℃
濃度：0.3 mg/mL セル長：1 mm
各温度におけるCollagen のフォールディングの割合
（221 nmにおけるCDの値から算出） |
●その他
必要試料量（タンパク質、ペプチド）
･250～200nm：0.2mg/mL，0.5mL (1mmセル)
･310～250nm：0.5mg/mL，2mL (10mmセル)
溶媒
･測定波長に吸収を持たない溶媒が適している。
･防腐剤 (アザイド等) は測定の妨害となる。
･PBS，トリス等は問題ない。
カテゴリー
ライフサイエンス , 医薬
分類
バイオ医薬品