01/20/2023
No.0640 GC/MSによる培地中のジメチルスルホキシドの高感度分析
細胞を凍結保存する際、ジメチルスルホキシド(DMSO)が凍結保護剤として使用されることが多いが、融解後には培地中にDMSOが残留するため、そのモニターが重要な場合がある。本研究では、GC/MSを用い、培地中のDMSOを定量する分析法を検討した。
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凍結保護剤としてのDMSOの役割と課題 |
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DMSOは、細胞内における氷晶形成を阻害し、細胞や細胞小器官の保護に効果的だと考えられている。さらに細胞内に浸透しやすいことから、哺乳動物細胞などの複雑な構造をもつ細胞に汎用されている一方、細胞毒性を有することも知られている。 |
凍結保存時 | 融解使用時 |
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・ 細胞
・ 凍結用培地(10%DMSO) | ・ 約10倍量の新たな培地を加え,遠心分離
・ 上清を除き細胞を使用 → DMSOが残留する |
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試料溶液の調製
培地のモデル試料に「DMEM+10%FBS」及び「M’cCoy’s 5A」を選定し、DMSO 4 μg/mL を加えた溶液を調製した。除タンパクはアセトンを用いた。 |
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カテゴリー
ライフサイエンス , 医薬
分類
再生医療/培養装置・培地・試薬, 安定性試験